樣品稀釋儀是現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化流程中的關(guān)鍵設(shè)備，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、臨床診斷、食品安全和環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。其核心使命是將高濃度的原始樣品，按照預(yù)設(shè)的比例，自動(dòng)、快速、精確地稀釋至目標(biāo)濃度，為后續(xù)的色譜分析、質(zhì)譜檢測(cè)、ELISA實(shí)驗(yàn)或細(xì)胞培養(yǎng)等提供合格的樣本。
“垃圾進(jìn)，垃圾出”是分析測(cè)試的黃金法則。稀釋儀作為樣品制備的“第一道關(guān)口”，其工作的準(zhǔn)確性和可靠性直接決定了整個(gè)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的質(zhì)量。一個(gè)未經(jīng)良好維護(hù)或校準(zhǔn)的稀釋儀，即使是微小的體積誤差或攜帶污染，都可能導(dǎo)致批次實(shí)驗(yàn)的失敗、錯(cuò)誤的結(jié)論，甚至在臨床診斷中引發(fā)嚴(yán)重后果。因此，建立一套科學(xué)、規(guī)范的維護(hù)與校準(zhǔn)體系，并非可有可無(wú)的“家務(wù)活”，而是保障實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)完整性、確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果可追溯和可信賴的戰(zhàn)略性舉措。本文將系統(tǒng)性地詳解樣品稀釋儀的維護(hù)與校準(zhǔn)方法，旨在為實(shí)驗(yàn)室管理者和操作人員提供一份全面、實(shí)用的行動(dòng)指南。
一、 維護(hù)篇：預(yù)防性保養(yǎng)，防患于未然
維護(hù)的核心思想是預(yù)防性保養(yǎng)，通過(guò)日常的、周期性的清潔和檢查，保持設(shè)備處于最佳工作狀態(tài)，將故障和性能衰退的風(fēng)險(xiǎn)降至低。
1. 日常維護(hù)：每次使用前后的“必修課”
清潔與消毒：
外部清潔：每次使用后，使用無(wú)絨布和70%異丙醇或合適的實(shí)驗(yàn)室級(jí)消毒劑擦拭設(shè)備外殼、操作面板和樣品艙，防止交叉污染。
管路與槍頭錐清潔：這是日常維護(hù)的重中之重。
執(zhí)行清洗程序：絕大多數(shù)稀釋儀都內(nèi)置了清洗程序。務(wù)必在每批次樣品處理前后，嚴(yán)格執(zhí)行該程序。通常使用去離子水、稀酸(如0.1M HCl，用于去除無(wú)機(jī)鹽殘留)或稀堿(如0.1M NaOH，用于去除有機(jī)物殘留)作為清洗液，通過(guò)正壓或負(fù)壓沖洗整個(gè)液體通路。
手動(dòng)沖洗：對(duì)于關(guān)鍵或易受污染的應(yīng)用，建議在自動(dòng)清洗程序后，再進(jìn)行一到兩次手動(dòng)沖洗。
使用兼容耗材：務(wù)必使用廠家推薦的或經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的兼容槍頭錐(Tip Cone)和移液槍頭，劣質(zhì)耗材是導(dǎo)致泄漏和污染的常見(jiàn)原因。
廢液處理：及時(shí)清空廢液瓶，并按生物安全和化學(xué)品安全的規(guī)定妥善處理廢液，防止溢出或產(chǎn)生有害氣體。
目視檢查：檢查電源線、數(shù)據(jù)線是否連接牢固，設(shè)備有無(wú)異常聲響或報(bào)警。
2. 每周/每月維護(hù)：深度清潔與檢查
管路與閥組的深度清潔：對(duì)于處理粘稠、易結(jié)晶或含有顆粒物的樣品后，即使執(zhí)行了日常清洗，也應(yīng)進(jìn)行更深度的清潔。
浸泡清洗：將可拆卸的管路、閥門等浸泡在適當(dāng)?shù)那逑匆褐?如酶清潔劑用于生物樣品，有機(jī)溶劑用于油脂類樣品)，一段時(shí)間后用純凈水沖洗干凈。
注意：此方法需參考設(shè)備手冊(cè)，避免損壞敏感部件。
濾芯更換：如果設(shè)備配備了用于過(guò)濾空氣或樣品的濾芯(如疏水濾芯)，應(yīng)根據(jù)使用頻率和水質(zhì)情況，定期(如每月或每季度)檢查其污染情況，并及時(shí)更換。
潤(rùn)滑：對(duì)于帶有機(jī)械運(yùn)動(dòng)部件(如注射器推桿)的設(shè)備，需按手冊(cè)要求，定期使用指定的潤(rùn)滑劑進(jìn)行潤(rùn)滑，確保其運(yùn)動(dòng)順滑、無(wú)阻滯。
校準(zhǔn)狀態(tài)核查：回顧近期的校準(zhǔn)記錄，確認(rèn)設(shè)備在校準(zhǔn)有效期內(nèi)。如發(fā)現(xiàn)設(shè)備運(yùn)行異常(如重復(fù)性變差)，應(yīng)考慮提前進(jìn)行校準(zhǔn)。
3. 年度/按需維護(hù)：專業(yè)級(jí)保養(yǎng)
全面檢修：聯(lián)系廠家或授權(quán)的專業(yè)工程師進(jìn)行全面的預(yù)防性維護(hù)。這可能包括：
拆解并清潔核心部件，如注射泵、旋轉(zhuǎn)閥的內(nèi)部腔室。
檢查和更換老化的密封圈、墊圈，這是防止泄漏的關(guān)鍵。
檢查和校準(zhǔn)內(nèi)部傳感器(如液位傳感器、壓力傳感器)。
更新設(shè)備固件和軟件。
關(guān)鍵部件更換：根據(jù)部件的使用壽命和實(shí)際磨損情況，有計(jì)劃地更換高損耗件，如注射器、管路、密封圈等。
二、 校準(zhǔn)篇：確保數(shù)據(jù)溯源，捍衛(wèi)數(shù)據(jù)完整性
校準(zhǔn)是通過(guò)使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來(lái)驗(yàn)證和調(diào)整設(shè)備性能，使其測(cè)量結(jié)果與國(guó)家或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)保持一致的可追溯過(guò)程。
1. 校準(zhǔn)前的準(zhǔn)備
標(biāo)準(zhǔn)器：
容量校準(zhǔn)：需要一套經(jīng)過(guò)法定計(jì)量機(jī)構(gòu)檢定合格的高精度微量天平(精度至少達(dá)到0.01mg)和與之匹配的校準(zhǔn)砝碼。
移液精度與重復(fù)性校準(zhǔn)：需要使用高純度的去離子水或密度已知的校準(zhǔn)液。
環(huán)境控制：將設(shè)備和天平放置在穩(wěn)定的環(huán)境中，避免溫度、濕度和氣流的劇烈波動(dòng)，因?yàn)檫@些因素都會(huì)影響稱量和液體體積的精度。
文檔準(zhǔn)備：準(zhǔn)備好校準(zhǔn)記錄表，明確本次校準(zhǔn)的依據(jù)(如JJF 1815-2020 《液液萃取/稀釋儀校準(zhǔn)規(guī)范》或設(shè)備廠商的推薦規(guī)程)、校準(zhǔn)項(xiàng)目和可接受標(biāo)準(zhǔn)。
2. 關(guān)鍵參數(shù)的校準(zhǔn)方法與可接受標(biāo)準(zhǔn)
| | | 可接受標(biāo)準(zhǔn)（示例，需參照具體標(biāo)準(zhǔn)和廠商規(guī)格） |
| | 稱重法：
1. 將一個(gè)潔凈干燥的容器放在天平上，去皮歸零。
2. 使用稀釋儀的最大和最小量程，分別吸取一定量的去離子水（如100μL, 500μL, 1000μL）至容器中。
3. 記錄天平顯示的水的質(zhì)量。
4. 根據(jù)水的密度（在校準(zhǔn)溫度下）將質(zhì)量換算為體積。
5. 重復(fù)測(cè)量3-5次，計(jì)算每個(gè)體積點(diǎn)的平均值和誤差。 | 準(zhǔn)確性：誤差 ≤ ±0.5% (或符合廠商規(guī)格，如±1%)。
線性：在全量程范圍內(nèi)的誤差應(yīng)符合要求。 |
| | 重復(fù)性測(cè)試：
1. 選擇一個(gè)中等體積點(diǎn)（如500μL）。
2. 使用同一支槍頭，連續(xù)進(jìn)行10-15次吸取-排放循環(huán)，每次都將液體排入同一個(gè)容器。
3. 稱量每次排放的質(zhì)量，并換算為體積。
4. 計(jì)算這組數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD%）。 | RSD% ≤ 1%? (對(duì)于大多數(shù)應(yīng)用，高精度設(shè)備要求 ≤ 0.5%)。 |
| | 交叉污染測(cè)試：
1. 先吸取一個(gè)高濃度樣品（或染色液）至廢液杯。
2. 立即執(zhí)行清洗程序。
3. 再吸取等量的去離子水或空白溶劑。
4. 通過(guò)光譜法（如紫外分光光度計(jì)）或目視檢查第二次吸取的液體中是否存在第一次樣品的殘留信號(hào)或顏色。 | 攜帶污染率 ≤ 0.1%? (或低于方法檢出限)。無(wú)任何肉眼可見(jiàn)的交叉污染。 |
| | 終點(diǎn)濃度法：
1. 配制一個(gè)已知準(zhǔn)確濃度的母液。
2. 使用稀釋儀，按照設(shè)定的稀釋比例（如1:10, 1:100）進(jìn)行稀釋。
3. 使用獨(dú)立的、經(jīng)過(guò)校準(zhǔn)的分析方法（如HPLC, UV-Vis）測(cè)定稀釋后樣品的實(shí)際濃度。
4. 將實(shí)測(cè)濃度與理論濃度進(jìn)行比較。 | 相對(duì)誤差 ≤ ±1%? (取決于應(yīng)用要求)。 |
| | 計(jì)時(shí)核查：使用獨(dú)立的秒表，核對(duì)設(shè)備運(yùn)行預(yù)設(shè)程序的時(shí)間是否準(zhǔn)確。 | |
3. 校準(zhǔn)結(jié)果與處理
所有校準(zhǔn)數(shù)據(jù)必須如實(shí)、詳細(xì)地記錄在案，并由校準(zhǔn)人員簽字確認(rèn)。
如果所有參數(shù)均在可接受標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)，則出具校準(zhǔn)證書(shū)，證明設(shè)備在該時(shí)間點(diǎn)性能符合要求。
如果發(fā)現(xiàn)任何參數(shù)超差，必須立即對(duì)設(shè)備進(jìn)行調(diào)試、維修或調(diào)整(如更換注射器、重新標(biāo)定傳感器)。維修后，必須重新進(jìn)行校準(zhǔn)，直至所有參數(shù)合格。
根據(jù)校準(zhǔn)結(jié)果，評(píng)估設(shè)備的狀態(tài)，并決定是否需要縮短下次校準(zhǔn)周期。
三、 最佳實(shí)踐與建議
建立SOP：為日常維護(hù)、定期保養(yǎng)和校準(zhǔn)流程編寫詳細(xì)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，確保所有操作人員都能以一致的方式進(jìn)行。
人員授權(quán)與培訓(xùn)：只有經(jīng)過(guò)嚴(yán)格培訓(xùn)并授權(quán)的人員才能進(jìn)行維護(hù)和校準(zhǔn)操作。
實(shí)施三級(jí)維護(hù)體系：將維護(hù)分為操作員級(jí)（日常）、技術(shù)員級(jí)（周/月）、工程師級(jí)（年度），職責(zé)分明，層層遞進(jìn)。
數(shù)據(jù)管理與追溯：建立設(shè)備檔案，將每一次的維護(hù)記錄、校準(zhǔn)證書(shū)、維修歷史、消耗的備件信息等集中管理，實(shí)現(xiàn)全生命周期的追溯。
供應(yīng)商管理：選擇有實(shí)力的設(shè)備供應(yīng)商和服務(wù)商，確保能獲得及時(shí)的技術(shù)支持和原廠備件。
結(jié)論
樣品稀釋儀的維護(hù)與校準(zhǔn)，是保障實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)質(zhì)量的“一體兩翼”。維護(hù)是“防御”，通過(guò)細(xì)致入微的保養(yǎng)，確保設(shè)備穩(wěn)定運(yùn)行，減少“非戰(zhàn)斗減員”；校準(zhǔn)是“校正”，通過(guò)建立量值的溯源性，確保每一次移液、每一次稀釋都有據(jù)可依，捍衛(wèi)了數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和完整性。將這兩項(xiàng)工作提升至實(shí)驗(yàn)室核心管理工作的高度，并持之以恒地執(zhí)行，是每一位負(fù)責(zé)任的實(shí)驗(yàn)室管理者和技術(shù)人員的必然選擇，也是在日益激烈的科研競(jìng)爭(zhēng)和嚴(yán)格的法規(guī)監(jiān)管中立于不敗之地的根本保障。
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